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      寵物藥敏檢測方法的正確認識

      選藥盒的技術問題 1. 藥敏檢測方法的正確認識藥敏檢測是一種體外實驗,代表細菌在體外的藥敏敏感性。受到藥物代謝、劑型、給藥方式、個體差異等影響,體外藥敏結果與體內藥敏結果有一定差異。但由于在人和動物細菌感染

      選藥盒的技術問題

      1. 藥敏檢測方法的正確認識

      藥敏檢測是一種體外實驗,代表細菌在體外的藥敏敏感性。受到藥物代謝、劑型、給藥方式、個體差異等影響,體外藥敏結果與體內藥敏結果有一定差異。但由于在人和動物細菌感染的治療中,無法通過體內實驗檢驗藥物的敏感性,因此,藥敏檢測是目前國際上唯一一種了解致病菌藥物敏感情況的方法。藥敏檢測結果的可靠性,不能完全通過藥物的實際實用效果來驗證。

      藥敏檢測的方法是一種常規方法,臨床上多采用紙片法。但藥敏檢測前需要進行致病菌的分離純化鑒定,致病菌的鑒定方法決定了藥敏結果的可靠性差異。一般來說,人們習慣將藥敏檢測前的致病菌鑒定也籠統歸入藥敏檢測的一個步驟,因而藥敏檢測方法按其嚴謹程度基本上分為兩大類,即標準藥敏檢測和簡化藥敏檢測。

      1) 標準藥敏檢測

      先從動物或人身上取樣分離致病菌。由于動物和人身上的細菌有億萬之眾,因此,分離鑒定致病菌有一定難度。一般應根據經驗確定推測致病菌的種類和含有致病菌較多的部位,然后取樣劃平板,挑取與推測致病菌形態一致的菌落,進行菌種鑒定。經鑒定的純化致病菌可用于藥敏檢測。

      致病菌的鑒定方法:

      l 嚴謹方法

      嚴格的致病菌鑒定方法需通過毒力回接,即將分離純化的疑似致病菌接入與感染個體種類相同或有可比性的健康動物個體。如疑似致病菌能使實驗動物產生與感染動物相同的癥狀,并且從實驗動物相同的部位取樣用相同的方法處理能分離到疑似致病菌,則該細菌可確證為實際致病菌。這種方法由于費時費力和動物模型模擬性的限制,只用于新疾病和新致病菌的科學研究,無法在臨床中應用。

      l 常規方法

      由現代醫學發展而來,是現在人類臨床中常用的藥敏檢測方法。對于人類疾病和動物的常規疾病,利用現代醫學的知識和多種檢測手段,已基本可以確定致病菌的種類。因此,只需根據推測致病菌的生化特性進行菌種鑒定,即可找到致病菌。這種方法的風險是一些新疾病和新致病菌,可能呈現的特征與某種常規疾病類似,造成誤診。但這種情況發生的概率較小。這種方法推廣的限制因素有兩條:一是常規診斷,一般醫院可實現,但獸醫有局限;二是菌種的生化鑒定,多數醫院無此條件。因此,該方法通常只局限于各方面條件均非常優厚的大醫院。

      2) 簡化藥敏檢測

      在現實操作中,特別是在獸醫臨床中,由于條件和成本的限制,藥敏檢測的準備步驟多在標準方法基礎上被簡化,其簡化內容仍然在致病菌的分離鑒定。

      l 單菌法

      用樣本涂布平板,挑取單菌落,進行藥敏檢測。此過程有時被與鏡檢和疾病常規知識結合,減少誤差,但未進行充分的常規檢驗和菌種生化鑒定。此方法與標準方法相比,操作簡化,一定程度上節約了成本和時間,但在對感染個體常規檢驗少的情況下,挑錯細菌的概率很大,造成“差之毫厘,謬之千里”。此方法較常用于獸醫臨床和中小醫院的人體臨床。用在養殖生產的獸醫臨床時,誤差很大;用在人類臨床上,因結合了臨床檢驗,誤差小于獸醫臨床,但仍遠遠高于標準方法。

      l 樣本替代法

      不分離鑒定致病菌,用樣本代替純化的致病菌。這種方法對于取樣部位的要求較高:如找到只含有致病菌的樣品,結果就非常準確;如樣品中細菌以致病菌為主或為主要菌群之一,則藥敏檢測結果具有很大參考性;如樣品中致病菌為極少數菌,則藥敏結果的參考價值較小。

      為什么樣品中含有雜菌,藥敏檢測結果仍具有參考性呢?

      科學實驗證實,當幾種細菌混合時,其藥敏結果同耐藥菌。即無論幾種菌混合,如果細菌數相差不過于懸殊(如數量差異在四五個數量級以上),則對于單種藥物而言,只要有一種細菌耐藥,則混合菌顯示耐藥。也就是說,如果致病菌在樣品中是主要的菌群之一(不一定是最大的菌群),則它的耐藥性在藥敏檢測結果中會得到充分體現,呈現敏感的藥物對致病菌一定有效,但顯示耐藥的藥物不一定無效(可能被非致病菌的耐藥性遮蓋)。因此,這種方法如運用得當,對指導用藥而言已經足夠。

      現在獸醫臨床上多采用這種方法,常見的步驟為:A. 根據經驗取樣,置于液體培養基或無菌水中,充分振蕩后取上清鋪平板,進行藥敏檢測。B. 直接用樣本或樣本勻漿物涂布在平板上,進行藥敏檢測。這兩種操作方法的缺陷是樣本中的細菌數通常不夠多,很難保證細菌在平板上均勻密布,因此,對抑菌圈難以判定。

      樣本替代法比上述任何一種其他藥敏檢測方法更簡單,節約時間至少一倍以上,贏得了治療的最佳時機。

      2. 選藥盒的評價

      天甲牌診斷選藥盒采用的是簡化藥敏檢測方法中的樣本替代法。

      1) 創新點和優勢:

      l 第一次將“為臨床治療服務的藥敏檢測手段(含其準備工作)”產業化,提供了一種產品及其配套使用方法,能在沒有專業設備的條件下,開展藥敏檢測,并保證檢測結果對臨床治療有較強的指導作用。

      l 以產品說明書的方式,提供了針對不同檢測對象的方法步驟,使操作步驟優化,提高藥敏結果的可靠性。與常用的同類方法相比,增加了液體培養步驟,提高了藥敏結果的可觀察性,增加了推廣應用的價值。雖然液體培養也增加了改變菌群比例的風險,但通過控制培養的條件,可以將這種風險減少到最低,即基本不影響選藥結果的指導性。

      l 對于復合感染,檢測結果的指導性高于其他方法。

      l 選藥盒設計的裝置,提高了藥敏的篩選效率。

      3. 藥物劑量問題

      l 由于養殖生產中預防用藥頻繁,治療用藥(包括寵物)盲目提高劑量,因此,用傳統的概念和國際上制定的藥物劑量標準已無法有效控制疾病。因此,常規方法與實際應用情況脫節。也就是說,如果以標準紙片做藥敏檢測,而超劑量用藥,那么原本無效的藥物可能效果很好;如果用增加藥物劑量的紙片(按一定比例增加藥物含量)做藥敏檢測,而按標準用藥或者各種藥物的使用劑量隨機變化,那么看似有效的藥物可能無效,藥效之間缺乏可比性。

      l 我們的選藥盒力求一定程度上改變這種局面,根據生產上實際用藥情況確定藥敏紙片的藥物含量。但此做法已無醫學上的規范可言。并且,由于各地的用藥情況相差懸殊,各品種藥物的使用劑量變化很大(如某地A藥的實際用量是標準劑量的2~3倍,B藥的實際用量是標準劑量的1.2~1.5倍),因此,用一套固定含藥量的紙片很難反應實際用藥的情況,若想結果具有代表性,只能根據多數情況設計劑量。也就是說,如果遇到亂用藥物劑量的情況,藥敏結果與實際用藥效果出現嚴重分歧也是相當正常的。

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