蜘蛛有很多的天敵，其中可以分為直接天敵和間接天敵，間接天敵那些破壞蜘蛛的卵的昆蟲，比如：螞蟻、胡蜂、甲蟲、蠅類、蝽類、蜻蜓、蟋蟀等等；直接天敵指的是哪些直接威脅蜘蛛的什么的天敵，主要有：蜂鳥、真菌、黃蜂等等。
一些動物，比如人類，只繁殖極少的后代，并投入大量的心血哺育后代，大部份后代得以存活。但是蜘蛛采用了另一種方式。一只蜘蛛能產大量的甚至數以千計的卵，但是只有很少的個體能活到成年。成蛛、幼蛛、蛛卵被一些生物如螞蟻、胡蜂、甲蟲、蠅類、蝽類、蜻蜓、蟋蟀、長腳蜘蛛、蝎子、螨類、鳥、蜥蜴，蛇，魚、真菌、人類及其它蜘蛛取食、寄生或破壞。
蜂鳥（以及其他的鳥類）利用蜘蛛網來串聯樹葉、苔蘚、地衣以及花瓣成鳥巢。在南美洲的一些普通蜂鳥用蜘蛛喂養幼鳥（成鳥吃花蜜而不是蜘蛛）
真菌類會感染蜘蛛的神經系統，從而影響蜘蛛的習性。一只被真菌感染的蜘蛛常常爬到高的空曠之處死亡，這可能有利于真菌孢子能被盡量遠的傳播。這只蜘蛛死亡在馬達加斯加島上的一棵半傾斜的大樹上。（這只被真菌感染的蜘蛛死在馬達加斯加島上的一棵大樹上）黃蜂通過蜇刺蜘蛛，使它們身體麻木，然后在其體內產卵，也會用蜘蛛來喂養幼蜂。泥蜂將被麻痹的活蜘蛛封在巢中。
許多昆蟲捕食蜘蛛。在圖中，螳螂正在吞食跳蛛。然而，事物也有另外一面——跳蛛也會捕食螳螂的幼體。
蜘蛛也可以成為是自己的最大敵人——它們也會自相殘殺。有些時候，蜘蛛會吃掉蜘蛛卵或幼蛛，更別說附近的蜘蛛和它們的配偶了。因此，也就不應該奇怪幾乎所有的蜘蛛都過著獨立的生活了。這種蜘蛛專吃其它蜘蛛，它長著長長的毒牙，可以從很遠的地方對附近的蜘蛛發動攻擊。
蜘蛛的天敵主要就是上述的這些，既有直接威脅其生命的，也有威脅其卵的。
