附紅細胞體病(Eperythozoonsis)是一種人畜共患有傳染性疾病,其病原體是附紅細胞體。該病早在本世紀20年代就被人們發現,只是近幾年來才引起畜牧獸醫工作者和醫學工作者的關注。1996年10月至1997年6月,我們對甘肅省蘭州市的部分軍犬、警犬及家犬進行了抽樣調查,現將結果報告如下。
一、材料和方法
1、犬靜脈血液
采自駐甘肅省蘭州市部隊、武警、公安及市民家中飼養的狼種犬、獅子犬前肢靜脈血39份,加抗凝劑,4℃冰箱保存備用。
2、檢查方法
(1)壓滴鏡檢
取靜脈血一滴于載玻片上,加等量生理鹽水稀釋,輕蓋蓋玻片,用顯微鏡在高倍鏡和油鏡下觀察。
(2)姬姆薩染色鏡檢
取靜脈血涂片,常規固定,姬姆薩染色法染色,油鏡下觀察。
3、判定標準
陽性:高倍鏡下觀察20個視野無附紅體這判為陰性。
4、犬附紅體低溫保存試驗
將犬陽性抗凝血11份保存于4℃冰箱中,每隔7天鏡檢一次,觀察紅細胞的感染率和附紅體的活動狀況。
5、犬附紅體人工感染率雛雞性血試驗
實驗組:取犬附紅體檢測結果為的抗凝血25μl,加入1ml雛雞性抗凝血中混勻,放入4℃冰箱保存10份,37℃培養箱保存10份,接種后立即進行鏡檢,結果犬紅細胞的感染率為,而雛雞紅細胞表面干干凈凈,無附紅體感染。而后每隔2天檢一次。
對照組:設雛雞陰性血4℃、37各5份,犬陽性血4℃、37℃各5份。
二、結果
1、犬附紅體體4℃冰箱保存試驗
共觀察11份陽性血液,7天后發現樣品原為+或++者全部變為Ⅲ或Ⅳ,21天時附紅體仍存活,且運動性較強,28天時觀察同21天結果相似,但運動性減弱,33天觀察時附紅體數量有所減少,運動性減弱。
2、犬積壓液紅細胞感染程度
在34份陽性血液中,+者占0.00%(0/34),++者占14.71%( 5/34),者占11.76%(4/34),者占73.53%(25/34)。表明很多紅細胞的數量也不等,少則3~5個,多則達20~30個,鏡下觀察紅細胞失去球形立體形態,邊緣不整而呈齒輪狀、量芒狀、不規則多邊形等多種扁平樣形狀。
3、犬附紅體的形態
顯微鏡高倍觀察,犬附紅體形態多為環形、圓形、卵圓形、頓點形、桿狀和巴蹄狀等多種形態,大多數聚集在紅細胞表面,少則3~5個,多則達20~30個,紅細胞失去球形形態,邊緣不整,有的呈齒輪狀、星芒狀,有的呈不規則多邊形等多種扁平樣形狀。附紅體活動靈活自如,伸展、旋轉、前后、左右、上下均可活動。
姬姆薩染色油鏡下觀察,附紅體被感染成淡紫色,外周有一白環,當調動微動螺旋時,折光性較強,附紅體中央發亮,形似空泡,其它觀察的形狀同上。
4、犬附紅體感染率
共抽查抗凝血32份進行鏡檢。
5、犬附紅體人工感染雛雞陰性血試驗
實驗組:接種后2、4天檢測,無論是4℃冰箱保存的還是37℃培養箱保存的,犬紅細胞感染率仍為Ⅳ,雛雞紅細胞未受感染,第5天37℃培養箱保存的10份血樣全部發生凝固而無法檢測,第6、8、10天檢測4℃冰箱保存的10份,結果有1份雛雞抗凝血個別細胞胞表面有1-2個犬附紅體,紅細胞感染率為+;第15天觀察,10份雛雞陰性抗凝血中有9份受到犬附紅體不同程度的感染,雞紅細胞犬附紅體不同程度有感染,雞戲細胞有犬附紅體的感染率為+者5份,++者1份,Ⅲ者1份,Ⅳ者2 份;雞紅細胞表面少則有1-2個犬附紅體,血漿中也有大量附紅體,且運動性很強,第20天觀察,1份陽性血仍為陰性,9份陽性血檢測結果為,犬附紅體減少,個別犬紅細胞表面攜帶有附紅體,有80%左右的犬紅細胞無附紅體,雞附紅體有感染率全部為+,血漿中有附紅體,但運動性減弱。
對照組:犬陽性血一直保持陽性,雛雞陰性血一直保持陰性。
三、小結與討論
1、本次共抽查了甘肅省蘭州市39條犬的靜脈血,結果發現犬附紅體的感染率很高,特別是狼種犬,感染率高達96%,平均感染率87.16%。在調查中未發現有癥狀的犬,但如此高的感染率而不發病,說是犬附紅體有毒力較弱。隨著附紅體在血液中數量有增加,必然會影響、干擾甚至破壞紅細胞及血液中其它成分有功能,在抵抗力下降或有應激因素(運輸、疲勞、饑餓、風雨侵襲等)的刺激時,可能會出現一系列有臨床癥狀。
2、據資料報道,犬附紅體病的癥狀主要表現為精神不振,四肢乏力,結膜蒼白或黃染,臥地嗜眠,體溫升高至40℃左右,心跳130-180次/分鐘,呼吸30-60次/分鐘,食欲減少,有嘔吐現象,糞便少且時干時稀,尿黃。3-5天后少數嚴重患犬由于虛脫、休克及殘廢轉歸外,多數可耐過急性經過而轉入慢性經過,臨床上仍表現為不同程度的貧血、消瘦、黃膽、低燒(體溫39℃左右)等為主要癥狀,病程可拖至一個月或更長一些時間。但有相當一部分患犬因繼發腸道細菌性感染,出現腹瀉或下簡,患犬仍主消瘦、食欲廢絕等癥狀。有的患犬則轉入隱性經過,成為“長期帶蟲”者。病理剖檢,主要變化為血液稀薄不易凝固,全身粘膜不同程度的黃染,淋巴結腫脹,肺臟水腫,心包積液,心冠脂肪黃染,心肌松馳,腹腔積液,肝腫黃染,膽囊充盈,膽汁濃稠,脾臟腫大,質地松軟等。除繼發感染病變外,其他組織器官均無明顯眼觀病變。
3、附紅體病的治療較為容易,國內外報道較多的是用新胂凡納明、四環素、黃色素、血蟲凈等進行治療,治愈率可達95%以上,磺胺類藥物、青霉素、鏈霉素等對本病很難奏效。
4、該病的傳播途徑,已知的是吸血昆蟲和扁虱、刺蠅、蚊、蜱等及小型嚙齒動物是該病的傳播媒介,其它途徑目前并不十分清楚。我們曾對人和奶牛都存在垂直傳播的現象,至于犬是否存在這種現象,有待進一步進行探討,其它途徑目前并不十分清楚。
5、附紅體的分類,按其所存在的部位,亦應屬血液病,但根據目前國際上普遍采用的《伯杰細菌鑒定手冊》,附紅體應屬立克次氏體目無漿體科附紅細胞體屬,其病原體是附紅體。
6、本試驗表明,附紅體在4℃環境中,至少可存活33天,說明其對低溫抵抗力比較強。而犬附紅體在感染雛雞感染力不強,但也存在交叉感染的現象,這為進一步系統研究附紅體打下了一定基礎。